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miRNA 是较小(约 22 bp)的高度保守非编码 RNA,在每种细胞类型中进行内源性表达。它通过碱基对互补使靶转录本沉默,从而起到基因表达关键调控因子的作用。许多研究表明miRNAs的表达谱与疾病息息相关,且可稳定的存在于多种体液(包括血液、唾液和尿液),出于这些原因,miRNA 作为非侵入性生物标志物成为了包括癌症在内几乎所有人类疾病的理想候选生物标志物。
乳腺癌是女性最常见的癌症之一,医学技术发展到今天,可以说很多乳腺癌都可以被治愈,但三阴性乳腺癌患者的治疗和生存不容乐观。很难治疗,因此迫切需要找到相关的生物标志物来实现对该疾病的早期检测。研究表明5 个 miRNA 的表达谱(miR-92a-3p、miR-342-3p、miR-16、miR-21 和 miR-199a-5p)可以有效区分 TNBC 和非 TNBC,有望在将来用于 TNBC 的诊断。
基于这些前期研究,海南医学院吕卓璇研究员联合碧芯生物共同开发了高通量检测三阴性乳腺癌相关miRNAs表达的方法。其原理主要是将等温扩增中的滚环扩增技术与悬浮芯片(磁性荧光编码微球)相结合,具体研究步骤如图1所示,首先将与TNBC相关的miRNA反转成cDNA,然后再通过其对应的连接引物连接成环;连接再不同荧光编码微球上的特异性的引物会与DNA环互补配对,对成环产物进行滚环扩增;最后通过流式细胞仪检测编码微球和扩增产物(采用荧光标记的dUTP)的荧光标记信号确定待测RNA样本的miRNA的类别和表达水平。
该篇文章“High-throughput quantitative detection of triple-negative breast cancer-associated expressed miRNAs by rolling circle amplification on fluorescence-encoded microspheres" 近期发表于在Chinese Chemical Letters (CCL)(2022年中科院分区1区, IF= 8.455)。
碧芯生物是一家专业从事低吸附磁性荧光编码微球自主研发以及流式细胞法检测多重蛋白试剂盒开发的生物高科技企业。公司是由在生物、材料、医学等多学科领域有着扎实研究基础和丰富实验经验的博士团队组成。现已开发70种低吸附磁性荧光编码微球,并在此基础上进一步研发出可灵活组合的多细胞因子检测试剂盒,包括小鼠多细胞因子检测试剂盒(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、IL-12p70、IL-1β,MCP-1、IFN-γ、TNF-α)和人类多细胞因子检测试剂盒(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-8、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、IFN-α2)。这些细胞因子的检测可根据实际需要进行自组合搭配,满足客户多样化应用场景的需求。
新的学期又要开始了,碧芯生物将提供更优质的产品和服务,祝愿各位老师取得更多更好的科研成果。
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